哪些用戶會選擇超微量紫外可見分光/熒光光度計DS-11FX
超微量紫外可見分光/熒光光度計DS-11FX
結合紫外可見光全光譜掃描和熒光光度計,給您一個史上測量范圍最廣的,涵蓋測量蛋白和核酸濃度的工具。
哪些用戶要選擇DS-11FX
1迎合實驗室多種樣本需求:既有極低濃度的樣本也有高濃度樣本
以DNA為例,低的低至0.5pg/ul,高的達到25000ng/ul。
2 樣品未純化,含有RNA或降解的DNA.
如粗提的總蛋白中,除去蛋白質還會有降解的DNA和未去除的RNA等,要想得到蛋白質的濃度,這些DNA和RNA 就是雜質。
3Buffer成分復雜,使UV-Vis測量不夠準確
那么這些buffer指的是那些特殊的buffer呢?又是在什么地方會用到呢?
這些buffer在UV-Vis分光光度計的260nm處有吸收,這樣就會影響核酸的定量(核算定量主要就是通過測量樣品在260nm的吸光值進行換算的)。下面就是舉例說明哪些buffer會在260nm或280nm干擾樣品的吸光值。這些buffer是市面上常見的:
1 殘留的苯酚-酚氯仿法提取DNA,苯酚在紫外范圍有很強的吸收,很小量的苯酚就能提取DNA,而苯酚的存在就會干擾DNA樣品在260nm處的吸收值。
2 Trizol-另外一種在提取DNA,RNA,蛋白質的buffer。如果樣品中沒有完全去除這種buffer,就會干擾在260nm和280nm處的定量。
3 RIPA裂解液-通常用于蛋白裂解,主要是從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白。如果未純化的樣品,含有這種物質,就會影響蛋白質的定量。
注意:以上只是眾多問題buffer中的一小部分。這就是研究者為什么一定要用滅菌水做blank,再用buffer(無DNA、RNA或蛋白質)作為樣品進行測量,看是否buffer會在260或280nm有吸收。如果溶解樣品的buffer在UV紫外有很強的吸收,那么需要用戶要么進一步純化樣品,要么就是改變測量方法(如熒光法,比色法)。
4 我想知道混合物中DNA,RNA,蛋白質分別的含量
純化后的樣品中,想知道是否還含有雜質,如蛋白質純化后,檢測還含有DNA或RNA沒有。
5 我有樣品需要進行二代測序。
我需要知道基因組DNA的濃度
6 我的樣品很難得到,極其珍貴,且得到的量很小。
7 我要利用樣本進行轉染實驗
8 我想對某種糖物質或是酶的濃度進行測量。
舉例:一種硼酸熒光分子探針經過簡單的化學修飾。這種基于Bodipy的熒光染料分子中的硼酸基團,能夠以共價鍵牢固地與被分析物結合,解決了普通熒光探針不能在水溶液中使用的難題。該類探針化合物的激發和發射波長均在可見光區;在近中性pH的實用檢測范圍內,對葡萄糖、葡萄糖酸、酒石酸等有很好的選擇性;具有很好的靈敏性。該探針化合物可用于實現以熒光方式對葡萄糖進行檢測。糖類、糖酸類及其相關分子在生物有機體的新陳代謝中、以及疾病診斷治療(如糖尿病等)有著非常重要的意義。識別生物有機體中的糖以及糖酸類化合物,并定量測試其在水溶液中的濃度,對于醫學和生物學都有重要的意義。