【激光全息應用】基于抗體芯片技術檢測血癌細胞藥物療效
血癌細胞與其他腫瘤細胞不同,屬于懸浮細胞,分布在培養基中的不同層,普通顯微鏡很難聚焦,因此需要其他的細胞分析方法。激光全息細胞成像分析系統M4提供了一種實時無標記分析細胞功能方法。
依托泊甙(etoposide,別名:足葉乙苷、依托撲沙)是一種光譜的抗腫瘤藥物。臨床用于白血病、小細胞肺癌、惡性淋巴癌、卵巢癌、絨毛膜癌、睪丸癌、膀胱癌、前列腺癌等。
2010年Stybayeva使用CD4/CD8抗體特異芯片捕獲并分析HIV感染的T細胞,發現CD4和CD8 T細胞的比率,是重要的HIV診斷標志物,得到的結果與其他方法得到的數據相符。
Zahra通過抗體芯片捕獲彌漫大B細胞性淋巴瘤U2932細胞和Jurkat細胞,使用激光全息非侵入分析這些細胞,原理如圖1所示,抗體為 Lewis X Clone-1.。該篇文章主要分析依托泊甙處理白血病T細胞和B細胞后,細胞死亡形態標志物。包括體積,面積,不規則度,偏心率等。
圖1.抗體芯片捕獲懸浮細胞后的全息圖 (A) 參考光 (B) 物光通過物體后 (C) 干涉圖像(D) 計算機計算得到的圖像 (E) 軟件分割(F)3D重構。
實驗目的
分析依托泊甙處理白血病T細胞和B細胞后,細胞死亡形態標志物,包括體積,面積,不規則度,偏心率等變化,從形態學方面評價藥效。
實驗材料
U2932細胞和Jurkat細胞,抗體為 Lewis X Clone-1.
圖2 藥物依托泊甙處理Jurkat細胞
圖2依托泊甙Etoposide和DMSO處理Jurkat細胞后,細胞隨時間減小 。使用激光成像系統分析Hstudio 軟件,得到細胞參數隨時間變化曲線圖3所示。Etoposide處理細胞后,細胞數,平均細胞面積,厚度,體積都減小,平均偏心率稍微增加,平均不規定度急劇增加。對照組細胞形態學沒有很明顯的變化。